【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：康珠生物乙型腦炎病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：Japanese encephalitis virus IgG antibody detection kit (ELISA)

【包裝規(guī)格】

96人份／盒 ，48人份／盒。

【預(yù)期用途】

本產(chǎn)品用于體外定性檢測(cè)人體血清、血漿或指尖末梢血中的乙型腦炎病毒IgG抗體。

流行性乙型腦炎是乙型腦炎病毒經(jīng)庫(kù)蚊傳播而使人體感染的一種傳染性疾病，感染患者以2-6歲兒童居多，病死率較高為5%-20%。人體感染該病毒后，能引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，發(fā)生腦炎而俗稱乙型腦炎，應(yīng)用乙型腦炎抗體的穩(wěn)定，很少變異的特點(diǎn)。預(yù)防免疫效果良好，所以通過(guò)免疫接種乙型腦炎病毒疫苗，使機(jī)體產(chǎn)生乙型腦炎病毒IgG抗體，達(dá)到乙型腦炎的預(yù)防效果。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用酶聯(lián)免疫間接法原理，用經(jīng)滅活純化的乙型腦炎病毒抗原包被酶標(biāo)板制備固相抗原，樣本中乙型腦炎病毒IgG抗體與包被抗原反應(yīng)，再與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鼠抗人IgG結(jié)合, 形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，加入底物TMB后產(chǎn)生顯色反應(yīng)，加入終止液后經(jīng)酶免分析儀測(cè)定OD值，再與臨界值比較以判定樣本中是否含有乙型腦炎病毒IgG抗體。

【主要組成成份】

本試劑盒由反應(yīng)板、酶結(jié)合物、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、濃縮洗滌液、顯色液A、顯色液B、終止液、樣品稀釋液、自封袋和封片組成：

【儲(chǔ)存條件及有效期】

試劑盒應(yīng)置2～8℃保存，有效期為十二個(gè)月。

生產(chǎn)日期、有效期至：見(jiàn)包裝標(biāo)簽。

【適用儀器】

酶免分析儀(檢測(cè)波長(zhǎng)450nm,參考波長(zhǎng)630nm)、洗板機(jī)、37℃恒溫水浴箱、移液器、振蕩器。

【樣本要求】

1. 血清樣本按常規(guī)方法由靜脈采集。血漿樣本可采用常規(guī)用量的抗凝劑（EDTA-2Na: 12g/L、肝素:15000IU/L、枸椽酸鈉：3.2g/L、草酸鈉: 0.01mol/L（1.34g/L））抗凝。

2.樣本應(yīng)新鮮，避免反復(fù)凍溶及溶血。樣本可在2-8℃保存一周，長(zhǎng)期保存應(yīng)于-20℃條件下儲(chǔ)存。

3.指尖末梢血樣本按照常規(guī)方法采集，指尖末梢血樣本可采用常規(guī)用量的抗凝劑（EDTA-2K）抗凝。指尖末梢血樣本取20µL加入樣本稀釋液120µL，靜置取上清液。

【檢驗(yàn)方法】

加樣：加血清或血漿樣本時(shí)每孔先加入樣本稀釋液100µL，再加入待測(cè)樣本10µL，輕輕振勻。或者加指尖末梢血樣本時(shí)，取20µL加入樣本稀釋液120µL，輕搖混勻，置室溫或2～8℃冰箱靜置，待紅血球全部沉降到管底后取上清液進(jìn)行檢測(cè)，每孔加入上清液100µL，輕輕振勻。

每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各2孔，每孔加入相應(yīng)對(duì)照血清100微升，并設(shè)空白對(duì)照1孔(暫不加任何液體)。

2.溫育：用封片封板后，37℃溫育60分鐘。

3.洗板：將濃縮洗滌液用純化水或雙蒸水稀釋20倍，設(shè)定洗板5次程序，每次浸泡時(shí)間為（30～60）秒，洗板結(jié)束后在吸水紙上拍干。

4.加酶：除空白對(duì)照孔外，每孔加入酶結(jié)合物50微升。

5.溫育：用封片封板后，37℃溫育30分鐘。

6.洗板：同步驟3。

7.顯色：每孔加入顯色液A、顯色液B各50微升，用封片封板后，輕輕振勻，37℃避光顯色15分鐘。

8.終止：每孔加終止液50微升，輕輕振勻。

9.測(cè)OD值：對(duì)空白對(duì)照調(diào)零，在酶標(biāo)儀450nm處測(cè)定OD值，或在雙波長(zhǎng)450nm/630nm處測(cè)定OD值。

10.結(jié)果分析：當(dāng)使用單波長(zhǎng)（450nm）測(cè)定時(shí)應(yīng)扣除空白值，當(dāng)使用雙波長(zhǎng)測(cè)定不應(yīng)扣除空白值。

【參考值（參考范圍）】

臨界值 cutoff value=0.10+陰性對(duì)照平均值（不到0.05按0.05算，超過(guò)0.05按實(shí)際值平均值計(jì)算。）

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

樣本OD值＜臨界值時(shí)，為陰性結(jié)果：表示待測(cè)樣本中未檢出乙型腦炎病毒IgG抗體；

樣本OD值≥臨界值時(shí)，為陽(yáng)性結(jié)果：表示待測(cè)樣本標(biāo)本中檢出乙型腦炎病毒IgG抗體，說(shuō)明既往感染或已經(jīng)過(guò)乙型腦炎疫苗的計(jì)劃免疫。

【檢驗(yàn)方法的局限性】

1.高靈敏度的免疫實(shí)驗(yàn)方法，存在潛在的非特異性反應(yīng)。

2.檢測(cè)高度溶血的樣本和有微生物污染的樣本時(shí)可能會(huì)有錯(cuò)誤的結(jié)果。

3.本檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，如需確診病例請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀及其他檢測(cè)手段，不得作為臨床診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)